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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 磷酸果糖激酶（PFK）活性检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro 6-Phosphofructokinase(PFK) Activity Assay Kit, Cat. KTB1124）是一款基于比色法设计的微量检测工具，可快速、定量地测定多种生物样本中磷酸果糖激酶（PFK）的活性，为糖酵解代谢研究提供关键数据支持。
磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解途径的核心限速酶，催化果糖-6-磷酸与ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP，其活性直接反映细胞能量代谢状态。CheKine™ PFK活性检测试剂盒通过酶偶联反应将PFK催化产物进一步转化为可在特定波长下检测的显色产物，吸光度变化与PFK活性成正比。该试剂盒适用于血清/血浆、动植物组织、细胞、细菌及细胞上清等样本类型，兼容微量体系（96孔板），显著降低样本消耗量。
该试剂盒专为细胞代谢研究设计，广泛应用于肿瘤细胞糖酵解机制研究、代谢性疾病模型构建、微生物发酵过程优化及药物靶点筛选等场景，助力揭示PFK在能量代谢调控中的关键作用。
| 中文名称 | 磷酸果糖激酶(PFK)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro 6-Phosphofructokinase(PFK) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1124 |
| 检测类型 | 糖酵解代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • Assay Buffer • Substrate Mix • Enzyme 1 • Enzyme 2 |
| 分子 | PFK |
| 检测指标 | PFK |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Assay Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Working Substrate Mix：临用前配制，加入 Assay Buffer 和去离子水充分溶解（48 T 的试剂盒需要 10.2 mL Assay Buffer 和 0.678 mL 去离子水；96 T 试剂盒需要 20.4 mL Assay Buffer 和 1.356 mL 去离子水），未用完的 Working Substrate Mix 分装后-20℃避光保存 2 周，避免反复冻融。
Enzyme 1：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。
Enzyme 2：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 60 mL (48 T) 60 mL×2 (96 T) | 4℃ |
| Assay Buffer | 11 mL (48 T) 22 mL (96 T) | 4℃ |
| Substrate Mix Powder | ×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T) | 4℃，避光保存 |
| Enzyme 1 | 600 μL (48 T) 1.2 mL (96 T) | -20℃，避光保存 |
| Enzyme 2 | 600 μL (48 T) 1.2 mL (96 T) | -20℃，避光保存 |
注意：对于脂肪含量较高的动物组织，离心后移除上层脂肪，再取上清液。如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine 货号：KTD3001 的蛋白质定量试剂盒（BCA 法）进行样本蛋白质浓度测定。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本ΔA 小于 0.002 可适当加大样本量。如果样本 ΔA>0.5，则说明活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液，或缩短反应时间至 2 min 或 5 min，使 ΔA<0.5（计算公式中乘以相应稀释倍数）。
单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1 nmol 果糖-6-磷酸和 1 nmol ATP 转化为 1 nmol 果糖-1,6-二磷酸和 1 nmol ADP 定义为一个酶活力单位。
单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1 nmol 果糖-6-磷酸和 1 nmol ATP 转化为 1 nmol 果糖-1,6-二磷酸和 1 nmol ADP 定义为一个酶活力单位。
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化 1 nmol 果糖-6-磷酸和 1 nmol ATP 转化为 1 nmol 果糖-1,6-二磷酸和 1 nmol ADP 定义为一个酶活力单位。
单位的定义：每毫升血清（浆）在反应体系中每分钟催化 1 nmol 果糖-6-磷酸和 1 nmol ATP 转化为 1 nmol 果糖-1,6-二磷酸和 1 nmol ADP 定义为一个酶活力单位。
V 反总：反应体系总体积，2.0×10-4 L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103 mol/L/cm；d：96 孔板光径，0.5 cm；109：1mol=1×109 nmol；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；W：样品质量，g；T：反应时间，10 min；n：样本稀释倍数；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；500：细菌或细胞总数，500 万。
将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm 调整为 d: 1 cm 进行计算即可。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
杂志名称: Frontiers in Plant Science | 作者: Zhang, Haitao, et al.
IF: 4.800 | 发表时间: 2025
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