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肌酸含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Creatine Content Assay Kit

产品货号
KTB1003

产品特点:

  • 微量体系:仅需少量样本即可完成 20 μg/mL 起测的高灵敏度检测。
  • 操作简洁:一步显色,室温反应,无需复杂前处理,适配常规酶标仪。
  • 线性范围宽:20-600 μg/mL 标准曲线覆盖常见生理与病理浓度区间。
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥189
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥358
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 肌酸含量检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Creatine Content Assay Kit) 是一种基于比色法的微量检测体系,可在 20-600 μg/mL 线性区间内,快速、准确地定量动物组织及血清(浆)样本中的肌酸含量。

    背景原理

    肌酸(Creatine)是脊椎动物体内一种关键的含氮有机酸,主要以磷酸肌酸形式存在于肌肉与脑组织中,通过 ADP→ATP 的快速再合成维持细胞能量稳态。动物体内肌酸水平受饮食摄入、运动量、品种、年龄及健康状态等多因素影响。本试剂盒利用肌酸在碱性条件下与联乙酰-α-萘酚发生特异性显色反应,生成红色产物,于 520 nm 处呈现稳定吸收峰;吸光度与样本中肌酸浓度成正比,从而实现对微量样本的高灵敏定量。

    应用领域

    本试剂盒适用于细胞代谢研究动物组织能量代谢评估血清(浆)肌酸水平监测,可广泛应用于运动生理学、营养干预、药物筛选及代谢疾病模型等科研场景。

    肌酸含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 肌酸含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Creatine Content Assay Kit
    产品货号 KTB1003
    检测方法 比色法
    样本类型 动物组织、血清(浆)
    试剂盒组分 •ReagentⅠ
    •ReagentⅡ
    •ReagentⅢ
    •ReagentⅣ
    •ReagentⅤ
    •Standard
    检测范围 20-600μg/mL
    灵敏度 20 μg/mL
    分子 肌酸
    检测指标 肌酸
    注意事项 •建议使用新鲜样本。如果不立即使用,可将样品在-80℃下保存一个月。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h内完成样品解冻。
    保存建议 建议收到货后避光保存于-20°C,有效期为6个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 520 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管、漏斗、滤纸
    • 水浴锅、低温离心机、制冰机
    • 去离子水
    • 匀浆器(用于组织样本)

    试剂准备

    ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Working ReagentⅡ:临用前配制;48 T加入 25 mL去离子水,96 T加入 50 mL去离子水 60℃水浴加热溶解后用滤纸过滤;未用完的试剂 4℃避光可保存三天,若有晶体析出可 60℃水浴加热溶解。

    Working ReagentⅢ:临用前配制;取 20 μL ReagentⅢ加入 20 mL去离子水,充分混匀,现用现配;用不完的 ReagentⅢ4℃避光保存。

    ReagentⅣ: 即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Working ReagentⅤ:临用前配制;向一瓶 ReagentⅤ中加入 20 mL ReagentⅣ充分溶解后,加入 2 mL Working ReagentⅢ充分混匀,配好后当天使用。

    注意:ReagentⅡ有一定毒性,ReagentⅢ和 ReagentⅤ有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    Standard:临用前配制;加入 1 mL去离子水,充分溶解得 10 mg/mL肌酸标准液,用不完的试剂 4℃保存 1个月。使用 10 mg/mL Standard,按照下表所示,进一步稀释标准品:

    序号Standard体积(μL)去离子水体积(μL)浓度(μg/mL)
    Std.148 μL 10 mg/mL Standard952480
    Std.240 μL 10 mg/mL Standard960400
    Std.332 μL 10 mg/mL Standard968320
    Std.424 μL 10 mg/mL Standard976240
    Std.516 μL 10 mg/mL Standard984160
    Std.68 μL 10 mg/mL Standard99280
    Std.74 μL 10 mg/mL Standard99640
    Blank01,0000
    注意:每次实验,请使用新配制的标准品;配制好的标准品需要在 4 h之内使用。

    样本制备

    注意:建议使用新鲜样本。如果不立即使用,可将样品在-80℃下保存一个月。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h内完成样品解冻。

    1. 动物组织:称取约 0.1 g样本,加入 1 mL去离子水,冰浴匀浆,10,000 g,4℃离心 10 min,取上清液,置冰上待测。

    2. 血清(浆):直接检测。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 520 nm,可见光分光光度计用去离子水调零。

    2. 水浴锅调至 30℃。

    3. 操作表(下述操作在 1.5 mL离心管中操作):

    试剂测定管(μL)标准管(μL)
    去离子水100100
    ReagentⅠ100100
    样本1000
    Standard0100
    Working ReagentⅡ100100
    混匀,10,000 g,4℃离心 10 min,取上清液于新的 1.5 mL离心管--
    上清液4040
    Working ReagentⅤ200200
    混匀,室温静置 5 min后,30℃水浴 30 min--
    去离子水200200

    4. 混匀,取 200 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中,记录 520 nm处吸光值 A,分别记为 A 测定,A 标准和 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:空白管和标准曲线只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本的ΔA 测定小于 0.05,可适当增大样本量,如果ΔA 测定大于 0.5,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 标准曲线的绘制

    以标准溶液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定代入方程得到 x (μg/mL)。

    2. 肌酸含量的计算:

    (1)按样本鲜重计算:

    肌酸(μg/g 鲜重)=x×V 样总÷W×F=x÷W×F

    (2)按样本体积计算:

    肌酸(μg/mL)=x×F

    V 样总:加入去离子水提取的体积,1 mL;W:样本质量;F:稀释倍数。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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