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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 糜蛋白酶活性检测试剂盒（微量法）(CheKine™ Micro Chymotrypsin Activity Assay Kit) 是一款基于 ATEE 水解反应的微量比色试剂盒，通过监测 237 nm 处吸光度的线性上升，快速、准确地定量动植物组织、血清（浆）或其他液体样本中的糜蛋白酶活性。
背景信息
糜蛋白酶（Chymotrypsin）是胰腺分泌的一种丝氨酸蛋白酶，可高效水解芳香族氨基酸残基羧基端的肽键，对变性蛋白质具有极强的分解能力。其催化底物 N-乙酰-L-酪氨酸乙酯（ATEE）水解后，产物在 237 nm 处产生特征吸收峰；通过连续记录 237 nm 吸光度的增加速率，即可计算样本中糜蛋白酶的活性。该酶在临床上常用于痰液稀化及术后创口愈合，在细胞代谢研究、药物筛选及食品工业中亦被广泛应用。
应用领域
细胞代谢研究、药物筛选、食品酶活性评估、临床诊断辅助及基础生命科学研究。
| 中文名称 | 糜蛋白酶活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Chymotrypsin Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB2330 |
| 检测类型 | 氨基酸代谢 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ |
| 分子 | Chymotrypsin |
| 检测指标 | Chymotrypsin |
| 注意事项 | • 推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent II：临用前配制；48 T加入 12 mL去离子水，96 T加入 24 mL去离子水充分溶解；用不完的试剂 4℃避光可以保存 3天。
注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 测定孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|
| 样本上清 | 20 | 0 |
| Reagent I | 0 | 20 |
| Reagent II | 200 | 200 |
充分混匀，于 237 nm测定 4 min内吸光值变化，分别记为 A 测定、A 空白（从吸光值稳定增加开始计时），计算ΔA 测定=A 测定-A 空白。
注意：空白孔只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验，如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 1.0，样本可用 Reagent I 进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
糜蛋白酶活性的计算：
活性单位定义：25℃每 mg蛋白每分钟催化吸光值增加 1为一个酶活单位。
活性单位定义：25℃每 g组织每分钟催化吸光值增加 1为一个酶活单位。
活性单位定义：25℃每 mL血清每分钟催化吸光值增加 1为一个酶活单位。
V 反总：反应总体积，0.22 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；V 样：加入样本体积，0.02 mL；V 样总：加入 Reagent I 总体积，1 mL；T：反应时间，4 min；W：样品质量，g。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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