买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。
活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 总巯基含量检测试剂盒（微量法）是一款专为细胞代谢研究设计的氧化应激检测工具，通过经典的 DTNB 显色反应，在 412 nm 处快速定量动植物组织、血清（浆）或其他液体样本中的总巯基含量，为研究者提供灵敏、稳定的微量检测方案。
生物体内的巯基主要以谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基两种形式存在：谷胱甘肽巯基可修复氧化损伤蛋白并参与活性氧清除，蛋白质巯基则对维持蛋白质正确构象至关重要。通过测定总巯基含量并结合谷胱甘肽含量，即可间接推算蛋白质巯基水平。试剂盒利用5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）与巯基反应生成黄色化合物，该产物在 412 nm 处具有最大吸收峰，吸光度与样本中总巯基浓度成正比，从而实现精确定量。
本试剂盒适用于细胞代谢、氧化应激及相关机制研究，可广泛应用于细胞培养上清、组织匀浆、血清（浆）等样本的总巯基含量测定，为抗氧化能力评估、药物筛选及疾病机制探索提供关键数据支持。
| 中文名称 | 总巯基含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Total Sulfhydryl Group Content Detection Kit |
| 产品货号 | KTB2310 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Standard |
| 分子 | Total Sulfhydryl Group |
| 检测指标 | Total Sulfhydryl Group |
| 注意事项 | • 推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent II：临用前配制；48 T加入 0.8 mL无水乙醇，96 T加入 1.6 mL无水乙醇充分溶解备用。4℃避光可以保存一个月。
Standard：临用前配制；加入 1.3 mL去离子水配制成 25 µmol/mL的谷胱甘肽标准品备用，4℃避光可保存 2周。
使用 25 μmol/mL谷胱甘肽标准液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（μmol/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 20 µL 25 μmol/mL Standard | 980 | 0.5 |
| Std.2 | 500 µL of Std.1 (0.5 μmol/mL) | 500 | 0.25 |
| Std.3 | 500 µL of Std.2 (0.25 μmol/mL) | 500 | 0.125 |
| Std.4 | 500 µL of Std.3 (0.125 μmol/mL) | 500 | 0.063 |
| Std.5 | 500 µL of Std.4 (0.063 μmol/mL) | 500 | 0.031 |
| Std.6 | 500 µL of Std.5 (0.031 μmol/mL) | 500 | 0.016 |
| Std.7 | 500 µL of Std.6 (0.016 μmol/mL) | 500 | 0.008 |
| Blank | 0 | 500 | 0 |
1. 组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL去离子水，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
2. 血清（浆）等液体样本：直接测定。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 412 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 酶促反应（下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中进行）：
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） | 标准孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 样本上清 | 40 | 40 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 40 | 0 |
| Reagent I | 150 | 150 | 150 | 150 |
| Reagent II | 10 | 0 | 10 | 0 |
| 无水乙醇 | 0 | 10 | 0 | 50 |
混匀，25℃静置 10 min后，于 412 nm处测定吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 标准、A 空白，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μmol/mL)。
2. 总巯基含量的计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
总巯基含量 (μmol/mg prot)=x×V 样总÷Cpr=x÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
总巯基含量 (μmol/g 鲜重)=x×V 样总÷W=x÷W
（3）按样本体积计算：
总巯基含量 (μmol/mL)=x
V 样总：加入去离子水体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
货号：KTB1270
亚科因生物研发的CheKine™ 丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可快速、便捷地...
货号：KTB1250
CheKine™ 线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为细胞代谢研究设计的微量比色法试剂盒，可在三...
货号：KTB1240
亚科因生物研发的 CheKine™ α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为细胞代谢研究设计的比色法试...
货号：KTB1230
CheKine™ 琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为微量样本设计的比色法试剂盒，可快速测定细胞、动物/植物...
货号：KTB1023
亚科因生物研发的CheKine™ 柠檬酸合酶（CS）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量酶活检测工具，可快速、灵敏地...
我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务
根据您的研究目标，提供个性化的实验设计方案
经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题
7x24小时在线技术支持，随时为您答疑解惑
提供免费样品试用，让您先试后买更放心
