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Q:该染液配置的方法是什么?

A:溶解步骤 用蒸馏水制备浓度为10 mg/mL的Hoechst33342储备液。 操作步骤(仅供参考) : (- )固定的组织细胞染色 1、根据实验具体要求,用无菌去离子水稀释到自己所需浓度,即为Hoechst 33342染色 工作液。细胞核染色时,一般推荐工作浓度为1~ 5μg/ml。 2、于细胞或组织样品, 固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免 疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色,如果不需要进行其 它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。 2、室温放置,轻轻吸除Hoechst 33342染色液。 4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~ 3次。 5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。 (二)活细胞染色 1、根据实验具体要求,无菌去离子水稀释到自己所需浓度,即为Hoechst 33342染色 工作液。细胞核染色时,-般推荐工作浓度为1~ 5μg/ml。 2、取96、24、6孔板培养细胞至合适状态,按96孔板加入100μl、 24孔板加入500ul、 6孔板加入1ml的比例,加入适当的Hoechst 33342染色液,染液必须充分覆盖细胞。 3、在适宜于细胞培养的条件下培养。 4、轻轻吸除Hoechst 33342染色液。 5、用无菌的PBS或生理盐水清洗2~3次。 6、进行荧光检测。

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