×

半纤维素含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Hemicellulose Concent Assay Kit

产品货号
KTB1730

产品特点:

  • 已验证样本类型齐全,操作简便,适配常规实验室设备
  • 微量体系设计,节省珍贵植物组织样本
  • 酸解-DNS 比色法,结果稳定、重复性良好
  • 4 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输,到货即用
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥569
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥939
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 半纤维素含量检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Hemicellulose Concent Assay Kit) 是一款基于酸解-DNS 比色法的细胞代谢检测工具,可在微量体系内快速、准确地测定植物细胞壁中半纤维素的含量,为细胞壁重构、生物质能评估及植物生理研究提供可靠数据。

    背景与原理

    半纤维素是植物细胞壁中与纤维素紧密结合的多糖混合物,是构成细胞初生壁的主要成分,广泛存在于植物中,被视为一种新型可利用能源。CheKine™ 半纤维素含量检测试剂盒(微量法)提供了一种简单、方便、快速的半纤维素检测方法,适用于植物组织样本。其原理是半纤维素经酸处理后转化成还原糖,与 DNS 生成红棕色物质,在 540 nm 有特征吸收峰,其吸光值的大小反映了半纤维素含量的高低。

    应用领域

    本试剂盒专为细胞代谢研究开发,可广泛应用于植物细胞壁组分分析、生物质能源作物筛选、植物逆境生理及发育生物学研究,为探索细胞壁重构机制能源植物改良提供关键数据支持。

    半纤维素含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 半纤维素含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Hemicellulose Concent Assay Kit
    产品货号 KTB1730
    检测方法 比色法
    试剂盒组分 •Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ
    •Reagent Ⅳ
    •Standard
    分子 Hemicellulose
    检测指标 Hemicellulose
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 540 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管
    • 烘箱、涡旋振荡仪、40目筛、水浴锅、分析天平、制冰机、低温离心机
    • 去离子水、80%乙醇、丙酮
    • 匀浆器

    试剂准备

    Reagent I:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。如有沉淀,80℃加热溶解。

    Reagent II:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Reagent III:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Reagent IV:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    注意:Reagent IV 有毒且有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    Standard:临用前配制;加入 1 mL去离子水溶解,配成 10 mg/mL D-木糖标准溶液备用,4℃可保存四周。

    标准品制备:10 mg/mL D-木糖标准溶液,按照下表所示,进一步稀释成标准品:

    序号Standard体积去离子水体积(µL)浓度(mg/mL)
    Std.1100 µL 10 mg/mL Standard9001
    Std.2180 µL of Std.1 (1 mg/mL)200.9
    Std.3160 µL of Std.1 (1 mg/mL)400.8
    Std.4120 µL of Std.1 (1 mg/mL)800.6
    Std.580 µL of Std.1 (1 mg/mL)1200.4
    Std.640 µL of Std.1 (1 mg/mL)1600.2
    Std.720 µL of Std.1 (1 mg/mL)1800.1

    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存一个月。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h内完成样品解冻。

    1. 样品 80℃烘干至恒重,粉碎,过 40目筛。称取 0.01 g烘干样本,加入 80%乙醇 1 mL,90℃水浴 30 min,冷却至室温,8,000 g,25℃离心 10 min,弃上清留沉淀,80℃烘干。
    2. 在上述烘干的沉淀中加入 1 mL Reagent I,充分混匀后,95℃水浴 60 min,取出冷却后,8,000 g,25℃离心 10 min,弃上清留沉淀,用蒸馏水清洗 3次(加入 1 mL去离子水用涡旋振荡仪混匀即可),8,000 g,25℃离心 10 min,弃上清留沉淀,再用丙酮清洗 1次(加入 1 mL丙酮用涡旋振荡仪混匀即可),8,000 g,25℃离心 10 min,弃上清留沉淀,80℃烘干。
    3. 在上述烘干的沉淀中加入 1 mL Reagent II,95℃水浴 30 min,取出冷却后,8,000 g,25℃离心 10 min。取上清 500 μL,加入 500 μL Reagent III,混匀后待用。

    注意:1. 80℃烘干的时间为 2 h,依据样本情况可延长烘干时间。

    2. 90℃或 95℃加热过程中 EP管可能爆开,建议用胶带封口或使用带螺旋盖的防爆 EP管。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min,调节波长到 540 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. 调节水浴锅至 90℃。
    3. 操作表(下述操作在 1.5 mL EP管中进行):
    试剂空白管(μL)测定管(μL)标准管(μL)
    上清液0600
    Standard0060
    去离子水6000
    Reagent IV195195195

    混匀,置于 90℃水浴中 5 min(盖紧,以防止水分散失),自然冷却,8,000 g,25℃离心 10 min,取 200 μL上清液至微量玻璃比色皿或 96孔板,于 540 nm处测定吸光值,分别记为 A 空白、A 测定、A 标准和 A 空白。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:标准曲线和空白管只需测 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.2可减小稀释倍数或适当加大样本量,如果ΔA 测定大于 2.0,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 标准曲线的绘制:以标准溶液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定带入方程得到 x (mg/mL)。
    2. 半纤维素含量的计算:半纤维素含量(mg/g 干重)=x×V 提取÷W×F

    V 提取:加入提取液体的体积,2 mL;W:烘干样品质量,0.01 g;F:样本稀释倍数。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

    相关资讯

    专业技术支持

    我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务

    实验方案设计

    根据您的研究目标,提供个性化的实验设计方案

    问题排查

    经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题

    在线技术咨询

    7x24小时在线技术支持,随时为您答疑解惑

    免费样品申请

    提供免费样品试用,让您先试后买更放心

    400电话
    在线咨询
    技术支持
    公众号
    公众号
    返回顶部